不溶性微粒檢查標(biāo)準(zhǔn)操作流程

第（一）法光阻法

實(shí)驗(yàn)環(huán)境

實(shí)驗(yàn)操作所處環(huán)境應(yīng)不得引人外來(lái)微粒，測(cè)定前的操作應(yīng)在潔凈工作臺(tái)進(jìn)行。玻璃儀器和其他所需的用品均應(yīng)潔凈、無(wú)微粒。本法所用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑 ），使用前須經(jīng)不大于 1.0µm 的微孔濾膜濾過(guò)。

 儀器裝置

對(duì)儀器的一般要求儀器通常包括取樣器、傳感器和數(shù)據(jù)處理器三部分。測(cè)量粒徑范圍為2?100µm，檢測(cè)微粒濃度為0?10000個(gè)/ml。儀器的校準(zhǔn)所用儀器應(yīng)至少每6個(gè)月校準(zhǔn)一次。

操作方法

取微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）符合下列要求：光阻法 取50ml測(cè)定，要求每10m l含10µm及 10µm以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在1 0粒以下，含25µm及 25µm以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在 2 粒以下。顯微計(jì)數(shù)法取50ml測(cè)定，要求含10µm及10µm以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在 2 0粒以下，含 25µm及25µm以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在5 粒以下。

檢查法

(1) 標(biāo)示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品至少4個(gè)，分別按下法測(cè)定：用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混 合均勻，立即小心開(kāi)啟容器，先倒出部分供試品溶液沖洗開(kāi) 啟口及取樣杯，再將供試品溶液倒入取樣杯中，靜置2分鐘 或適當(dāng)時(shí)間脫氣泡，置于取樣器上（或將供試品容器直接置 于取樣器上）。開(kāi)啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），每個(gè)供試品依法測(cè)定至少3次，每次取樣應(yīng)不少于5ml，記錄 數(shù)據(jù)，棄第（一）次測(cè)定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè) 定結(jié)果。

(2) 標(biāo)示裝量為25ml以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品至少4個(gè)，分別按下法測(cè)定：用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混合均勻，靜置2分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣泡，小心開(kāi)啟容器，直接將供試 品容器置于取樣器上，開(kāi)啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻（避免產(chǎn)生氣泡），由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣 泡為限），測(cè)定并記錄數(shù)據(jù)，棄第（一）次測(cè)定數(shù)據(jù)，取續(xù)測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè)定結(jié)果。

(1)、（2)項(xiàng)下的注射用濃溶液如黏度太大，不便直接測(cè)定時(shí)，可經(jīng)適當(dāng)稀釋，依法測(cè)定。也可采用適宜的方法，在潔凈工作臺(tái)小心合并至少4 個(gè)供試品的內(nèi)容物（使總體積不少于25ml)，置于取樣杯中，靜 置 2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣泡，置于取樣器上。

開(kāi)啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定至少4次，每次取樣應(yīng)不少于5ml。棄第(一)次測(cè)定數(shù)據(jù)，取后續(xù)3次測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè)定結(jié)果，根據(jù)取樣體積與每個(gè)容器的標(biāo)示裝置體積，計(jì)算每個(gè)容器所含的微粒數(shù)。

靜脈注射用無(wú)菌粉末除另有規(guī)定外，取供少4個(gè) ，分別按下法測(cè)定：用水將容器外壁洗凈，小心開(kāi)啟 瓶蓋，精密加人適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），小心蓋上瓶蓋，緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，靜 置 2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫 氣泡，小心開(kāi)啟容器，直接將供試品容器置于取樣器上，開(kāi) 啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)，使溶液混勻(避免氣泡產(chǎn)生），由儀 器直接抽取適量溶液（以不吸人氣泡為限），測(cè)定并記錄數(shù)據(jù) ；棄第(一)次測(cè)定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè)定 結(jié)果 。

也可采用適宜的方法，取至少4 個(gè)供試品，在潔凈工作臺(tái)上用水將容器外壁洗凈，小心開(kāi)啟瓶蓋，分別精密加人適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，

小心合并容器中的溶液（使總體積不少于25ml)，置于取樣杯中，靜置 2 分鐘或適當(dāng)時(shí)間脫氣泡，置于取樣器上。開(kāi)啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測(cè)定至少4 次 ，每次取樣應(yīng)不少于5ml，棄第(一)次測(cè)定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè)定結(jié)果。

供注射用無(wú)菌原料藥按各品種項(xiàng)下規(guī)定，取供試品適量（相當(dāng)于單個(gè)制劑的最大規(guī)格量)4份，分別置取樣杯或適宜的容器中，照上述（3)法 ，自 “精密加入適量微粒檢 查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解”起 ，依法操作，測(cè)定并記錄數(shù)據(jù)，棄第(一)次測(cè)定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測(cè)定數(shù)據(jù)的平均值作為測(cè)定結(jié)果。

注意事項(xiàng)

 光阻法不適用于黏度過(guò)高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適 用于進(jìn)人傳感器時(shí)容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。對(duì)于黏度過(guò)高，采用兩種方法都無(wú)法直接測(cè)定的注射液，可用適宜的溶劑稀釋后測(cè)定。

結(jié)果判定

(1) 標(biāo)示裝量為 100m l或 100m l以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每1ml中含以上的微粒數(shù)不得過(guò)25粒 ，含 2 5µm及 25µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)3 粒 。

 (2) 標(biāo)示裝量為100ml以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無(wú)菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無(wú)菌原料藥除另有規(guī)定外，每個(gè)供試品容器（份）中含10µm及 10µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)6000粒，含 25µm及 25µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)600 粒。

第二法顯微計(jì)數(shù)法

 簡(jiǎn)述

 顯微計(jì)數(shù)法是將一定體積的注射液濾過(guò)，使所含外來(lái)不溶性微粒截留在微孔濾膜上，在 100 倍顯微鏡下，用經(jīng)標(biāo)定的目鏡測(cè)微尺分別計(jì)算其最長(zhǎng)直徑大于10μm和大于25μm 的微粒，根據(jù)過(guò)濾面積上的微粒總數(shù)，計(jì)算出被檢測(cè)的注射液每 1ml（或每個(gè)容器）中含不溶性微粒的數(shù)量。

對(duì)儀器的一般要求儀器通常包括潔凈工作臺(tái)、顯微鏡、微孔濾膜及其濾器、平皿等。

實(shí)驗(yàn)環(huán)境

潔凈工作臺(tái)高效空氣過(guò)濾器孔徑為0.45µm，氣流方向由里向外。 顯微鏡雙筒大視野顯微鏡，目鏡內(nèi)附標(biāo)定的測(cè)微尺 (每格5?10µm)。坐標(biāo)軸前后、左右移動(dòng)范圍均應(yīng)大于30mm，顯微鏡裝置內(nèi)附有光線投射角度、光強(qiáng)度均可調(diào)節(jié)的照明裝置。檢測(cè)時(shí)放大100倍。

微孔濾膜孔徑0. 45µm、直徑 25mm或13mm, —面印有間隔3mm的格柵；膜上如有10µm及10µm以上的不溶性微粒，應(yīng)在 5 粒以下，并不得有及25µm以上的微粒，必要時(shí)，可用微粒檢査用水沖洗使符合要求。

檢查前的準(zhǔn)備 

 在潔凈工作臺(tái)上將濾器用微粒檢查用水(或其他適宜溶劑）沖洗至潔凈，用平頭無(wú)齒鑷子夾取測(cè)定用濾膜，用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗后，置濾器托架上；固定濾器，倒置，反復(fù)用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗濾器內(nèi)壁，控干后安裝在抽濾瓶上，備用。

檢查法

(1) 標(biāo)示裝量為25m l或 25m l以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品至少4個(gè) ，分別按下法測(cè)定：用水將容器外壁洗凈，在潔凈工作臺(tái)上小心翻轉(zhuǎn)2 0次 ，使溶液混合均勻，立即小心開(kāi)啟容器，用適宜的方法抽取或量取供試品溶液25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入經(jīng)預(yù)處理的濾器(濾膜直徑25mm)中。靜置1分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干，然后用平頭鑷子將濾膜移置平皿上(必要時(shí)，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整），微啟蓋子使濾膜適當(dāng)干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺(tái)上。調(diào)好入射光 ，放大 100倍進(jìn)行顯微測(cè)量，調(diào)節(jié)顯微鏡至濾膜格柵清晰 ，移動(dòng)坐標(biāo)軸，分別測(cè)定有效濾過(guò)面積上最長(zhǎng)粒徑大于10µm和 25µm的微粒數(shù)。計(jì)算三個(gè)供試品測(cè)定結(jié)果的平均值。

(2) 標(biāo)示裝量為25ml以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外 ，取供試品至少4 個(gè) ，用水將容器外壁洗凈 ，在潔凈工作臺(tái)上小心翻轉(zhuǎn)20次 ，使混合均勻，立即小心開(kāi)啟容器，用適宜的方法直接抽取每個(gè)容器中的全部溶液 ，沿濾器內(nèi)壁緩緩注人經(jīng)預(yù)處理的濾器（濾膜直徑13mm)中，照上述（1)同法測(cè)定。

 (3) 靜脈注射用無(wú)菌粉末及供注射用無(wú)菌原料藥除另有規(guī)定外，照光阻法中檢査法的（3)或 （4)制備供試品溶液，同上述（1)操作測(cè)定。

結(jié)果判定

 (1) 標(biāo)示裝量為 100ml或 100m l以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每1ml中 含10µm及10µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)12粒 ，含 25µm及 25µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)2 粒。

(2) 標(biāo)示裝量為100ml以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無(wú)菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無(wú)菌原料藥除另有規(guī)定外，每個(gè)供試品容器（份）中含1µm及10µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)3000粒，含 25µm及25µm以上的微粒數(shù)不得過(guò)300粒 。